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根据功能分为HPLC和UHPLC、UPLC柱,根据内径大小又有常规分析柱,、窄径柱和毛细管柱的类型区别,其中应用广泛的液质联用仪就是用的窄径柱。因为分析类的仪器主要致力于对样品成分的判断,就需要能够准确分离少量样品的内径较小的色谱柱。而内径孔大的色谱柱用于进样量大的成品纯化和分离。
使用结束一定要注意色谱柱的清洗保存,用缓冲溶液进行在线冲洗,注意柱中填充物的稳定性。冲洗结束*浸泡在合适的溶剂里,防止它受到空气、水的污染。理论上,合理规范保存的BIOBASIC液相色谱柱能够使用两年之久。如果发现BIOBASIC液相色谱柱的效果大不如前,就试一下看是否因为内部污染造成。尝试进行在线稀硝酸冲洗,或者将其中的零部件拆下进行分别清洗。也可以试着将里面的填充物取下换上新的。如果这些办法都不可行,就只有一个方法——更换新的色谱柱。
BIOBASIC液相色谱柱在使用缓冲液的过程中还要注意以下几点:
a.避免使用盐酸盐,盐酸盐对钢质有腐蚀作用;
b.缓冲液要现配现用,往往缓冲液是良好的菌类培养液,隔天或放置长时间实验时会发生很多怪现象;
c.使用缓冲液要及时掌握pH范围,做到胸中有数;
d.清洗液路和柱子时,有温控可加热到30摄氏度易于冲洗;
e.长时间用缓冲溶液要注意观察接头处有无析出,若有白色盐类析出,定期用10%硝酸冲洗液路可以避免液路的堵塞;
f.选择缓冲液要用可靠的试剂,避免不纯的盐类造成不必要的麻烦;
过渡流动相是指有机相和水相的组成与分析流动相相同,但是不含缓冲盐的溶液。