液相色谱柱的正相柱和反相柱使用方法介绍

　　
　　
　　液相色谱柱是运用于色谱仪系统中起着分离作用的仪器，是色谱仪分析系统的核心部件，色谱柱柱效的高低影响着检测速率的快慢以及检测结果的准确性。对色谱柱的要求是柱效高、选择性好，分析速度快。色谱柱的性质（粒度、粒径分布等）、填充料、柱长、固定相和流动相的种类等都是影响色谱柱柱效的因素。因此，为了提高色谱柱的柱效，保证液相色谱仪分析检测的灵敏性，了解液相色谱柱的结构性能尤为重要。
　　
　　液相色谱柱通常分为正相柱和反相柱。正相柱大多以硅胶为柱，或是在硅胶表面键合-CN,-NH3等官能团的键合相硅胶柱;反相柱填料主要以硅胶为基质，在其表面键合非极性的十八烷基官能团（ODS）称为C18柱，其它常用的反相柱还有C8,C4,C2和苯基柱等。另外还有离子交换柱，GPC柱，聚合物填料柱等。
　　
　　正相色谱柱的使用方法
　　
　　1.新柱子可直接用流动相。推荐先用正己烷-乙腈（99：1）以0.5ml/min的流速冲10倍柱体积，再根据流动相选用极性相近的氯仿或二氯甲烷以相同的流速冲10倍柱体积，zui后换成流动相；
　　
　　2.正相使用时，不宜分析含醛基、羰基的化合物，不可用于还原糖的分析；流动相要*脱气，并不得含有羰基化合物和过氧化物（质量不好的乙醚、四氢呋喃含有少量）；
　　
　　3.任何时候更换流动相时都要确保新流动相与柱子原保存液可互溶。
　　
　　反相色谱柱的使用方法
　　
　　1.先用正己烷-乙腈（99：1）以0.5ml/min的流速冲10倍柱体积，再依次以相同的流速相同的用量用氯仿、异丙醇、甲醇、甲醇-水（50：50）冲柱子；
　　
　　2.以0.5ml/min的流速用30倍柱体积的pH11.0的氢氧化钠（LUNA）水溶液冲柱子（注意pH值切不可超过11.0），立即用水（0.5ml/min的流速，30倍柱体积）冲洗，再换成流动相；
　　
　　3.配制流动相时，应各组分分别量取，比例较小的组分要精密量取，需调pH值时要精密到0.1；
　　
　　4.反相条件下使用时，要特别注意控制pH值范围，pH值越低越有发生水解的危险，流动相中水的比例越高当然也越有发生水解的危险。的pH范围在pH3.0-7.0；
　　
　　5.如果要使用的流动相中还含有缓冲盐类，建议在用分析流动相之前，先用不含缓冲盐的同比例流动相过渡，这样可避免缓冲盐在分析柱内的析出。